ESTM - Mestrado em Biotecnologia dos Recursos Marinhos
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Browsing ESTM - Mestrado em Biotecnologia dos Recursos Marinhos by advisor "Afonso, Clélia Paulete Correia Neves"
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- Anabaena cylindrica – Revisão de conhecimentosPublication . Lage, Luís Salvador do Amaral; Mouga, Teresa Margarida Lopes da Silva; Afonso, Clélia Paulete Correia Neves; Chagas, Bárbara FerreiraAs alterações climáticas têm vindo a desequilibrar ecossistemas por todo o mundo, com foco especial ao aumento global de temperatura, que tem afetado tanto a vida terrestre como a vida marinha. Com o aumento da temperatura da água, tem se observado com mais frequência o aparecimento de “blooms” de microrganismos fotossintéticos, sendo as cianobactérias, um dos principais responsáveis, por estes fenómenos. As cianobactérias do género Anabaena sp. são procariotas fotossintéticos multicelulares filamentosos, que exibem estratégias de fixação do azoto atmosférico, através da presença de células especializadas, denominadas de heterocistos, que lhes permitem sobreviver em vários ambientes, bem como a capacidade de desenvolver acinetos, que são células especializadas de resistência, quando as condições são desfavoráveis ao seu crescimento. Produzem também toxinas, que podem ter impactos devastadores para o ecossistema e para a saúde humana. As cianobactérias têm vindo a ser identificadas como fonte de compostos de interesse como os exopolissacáridos e pigmentos, maioritariamente sobre a forma de ficobiliproteínas, ambos são desejados para as indústrias de cosmética, alimentação e farmacêutica. Neste trabalho pretende-se expor que conhecimentos há atualmente sobre cianobactérias, com especial atenção para a espécie Anabaena cylindrica, abordando temas como, os compostos ativos produzidos, destacando-se os exopolissacáridos e as ficobiliproteínas, as metodologias de cultivo e de recolha de biomassa e os processos de purificação.
- Aquacultura de Chondrus crispus e extração de carragenanasPublication . Tanoeiro, João Rui de Azevedo Godinho Pereira; Pereira, Leonel Carlos dos Reis Tomás; Afonso, Clélia Paulete Correia NevesSabe-se que as algas, no seu geral, são consumidas pelos seres humanos há milhares de anos. A procura deste alimento funcional, rico em compostos bioativos, continua a ser claramente superior nos países asiáticos (sendo parte da cultura culinária asiática), no entanto nos países ocidentais já se nota um crescimento na sua popularidade. A aquacultura de macroalgas poderá ser a solução para aumentar disponibilidade de biomassa algal e reduzir o seu custo drasticamente. A macroalga vermelha Chondrus crispus (conhecida comummente por Musgo Irlandês) é já reconhecida há séculos pelo seu uso alimentar e pelo seu teor em compostos de interesse para o Ser Humano. Com a visível diminuição deste recurso na nossa costa (nomeadamente devido à colheita excessiva para exploração e venda) e o seu elevado interesse biotecnológico, devido a compostos tais como as carragenanas, este estudo foca-se no desenvolvimento de técnicas de aquacultura desta espécie, de forma a mitigar os efeitos da sua colheita e verificar o teor em carragenanas. Foram comparadas quatro metodologias: Free Floating, Tentativa de fixação a Rocha, Gaiolas (cages) e linhas fixas semelhantes a Long Line. Visivelmente, o melhor método em termos de crescimento foi o Berçário 0, de tipologia Free Floating, em que ao 24º dia de cultivo obtivemos uma taxa específica de crescimento (SGR) de 2,08%/dia ± 0,47. O pior método em termos de crescimento foi o Berçário 2 (com tentativa falhada de fixação da alga à rocha), onde a SGR a 28 dias foi de 0,33%/dia ± 0,69. Já na extração de carragenanas da macroalga, toda a biomassa derivada dos métodos de aquacultura testados (Berçário 1- Free Floating; Berçário 2- Tentativa de fixação a rocha; e cages) demonstrou um menor teor de carragenanas quando comparada com a biomassa selvagem obtida por colheita (50,95%/dia ± 4,10). No entanto, o método Free Floating do Berçário 1 apresentou um teor de carragenanas aceitável de 31,43% ± 7,00. Após análise de valores de SGR semanais e redução de nutrientes na água dos berçários, foi visível uma correlação positiva. Devemos então investir na aquacultura desta espécie de forma a impedir a redução da mesma nas nossas costas de forma irreversível.
- Avaliação do potencial dos extratos das macroalgas Codium tomentosum e Gracilaria gracilis como bioestimulantesPublication . Ferreira, Carolina Andreia dos Santos; Afonso, Clélia Paulete Correia NevesAs macroalgas são organismos fotossintéticos, muito diversificados. A espécie Gracilaria gracilis, bem como o Codium tomentosum, são comestíveis e apresentam compostos bioativos de elevado interesse, com diversas aplicações em diferentes áreas (alimentar, cosmética, entre outras). Embora não sejam atualmente utilizadas de forma ampla na agricultura, as macroalgas são usadas há já muito anos como bioestimulantes de plantas. Recentemente, ressurgiu um novo interesse nas aplicações agrícolas das macroalgas, relacionado com a procura crescente de produtos que não prejudicam o ambiente e que tornam a produção vegetal mais rentável e sustentável. As macroalgas apresentam na sua constituição, polissacarídeos e hormonas vegetais, (tais como as auxinas, as citocininas, o etileno, as giberelinas e o ácido abscísico), substâncias conhecidas por desempenharem um papel relevante no desenvolvimento e fisiologia das plantas. São também ricas em proteínas, fibras, vitaminas e minerais. O principal objetivo deste trabalho foi a determinação do potencial bioestimulante de extratos de macroalgas, com especial ênfase no seu efeito sobre a germinação e o crescimento de plantas. Adicionalmente, foi testado o potencial aumento da resistência ao stress térmico e ao stress salino. O efeito bioestimulante foi testado em duas espécies agrícolas: alface (Lactuca sativa L.) e tomate (Solanum lycopersicum L.). Foi possível concluir que, na maioria dos ensaios, as sementes expostas aos extratos de macroalgas das espécies testadas (Gracilaria gracilis ou Codium tomentosum) apresentam uma germinação mais acelerada do que o controlo, traduzida por uma percentagem de germinação mais elevada, em cada dia, apresentando, ainda, um desenvolvimento superior das radículas e dos hipocótilos N, bem como uma percentagem de humidade mais elevada. Foi, ainda, possível constatar que as sementes expostas aos extratos de Gracilaria gracilis e de Codium tomentosum apresentam uma maior resistência ao stress salino e ao stress térmico.
- Biosilica from deep-sea marine sponge Geodia barretti for the development of 3D printed scaffolds for bone tissue regeneration applicationsPublication . Colares, Rodrigo Valente; Silva, Tiago José Quinteiros Lopes Henriques da; Marques, Catarina; Dudik, Olesia; Afonso, Clélia Paulete Correia NevesOs oceanos sempre foram um grande instigador da curiosidade humana e, desde os tempos das grandes navegações até os dias atuais. Estima-se que a biodiversidade dos oceanos seja maior do que a das florestas tropicais, sendo ainda pouco conhecida e considerada a última barreira às descobertas científicas no planeta. As esponjas marinhas são um dos animais invertebrados mais antigos neste ambiente, sendo estudadas mais recentemente por várias áreas de investigação, pela sua interação com outros microrganismos e propriedades estruturais. As esponjas marinhas apresentam composições fisiológicas, que podem ser utilizados em abordagens terapêuticas, nomeadamente na medicina regenerativa. Além disso, a biossílica de esponjas marinhas tornou-se atraente por sua aplicação em estratégias de engenharia de tecido ósseo. A biossílica de Geodia barretti (GB) foi um material alvo em nosso estudo em comparação com Diatomaceous Earth (DE) e Bioglass® 45S5 (BG) na produção de tintas à base de alginato para fabricação de andaimes de impressão 3D. A obtenção das partículas cerâmicas à base de GB foi realizada através do processo de calcinação. Antes da formulação da tinta, a produção das partículas de sílica de GB, DE e BG foram padronizadas por tamanho na faixa de 36 a 63 µm e caracterizadas físico-quimicamente com o uso de espectroscopia de infravermelho por transformada de Fourier (FTIR), difração de raios-X (XRD) e Microscopia Eletrônica de Varredura - Espectroscopia Dispersiva de Raios-X (MEV / EDS). As “tintas” foram desenvolvidas pela mistura de materiais à base de sílica com solução de alginato e a respetiva avaliação reológica apresentou módulos viscosos e elásticos estáveis, apoiando o avanço para a impressão 3D para produção de scaffolds. A porosidade e distribuição de tamanho de poro dos scaffolds obtidos foram avaliados pela técnica de imagem de micro-TC de raios-X, mostrando sua alta porosidade e interconectividade. A bioatividade dos scaffolds foi analisada por imersão em fluido corporal simulado por até 21 dias seguida pela deteção da formação de fosfato de cálcio em sua superfície, usando MEV / EDS. Os resultados dos testes mecânicos apontam para propriedades de compressão insuficientes quando comparadas às exibidas pelo tecidoalvo. A avaliação biológica dos scaffolds de sílica-alginato com e sem recobrimento de colágeno mostrou que as formulações com biossílica GB tiveram desempenho igual ou melhor que as demais, com a adição de colágeno melhorando a adesão e proliferação celular nos scaffolds.
- Cultivation of the wild seaweed Gracilaria gracilis under laboratory scale: The Effect of Light Intensity and Nutrients on Growth, Pigment and Total Soluble Protein ContentPublication . Bastos, Gonçalo Filipe Pica Cabral; Mouga, Teresa Margarida Lopes da Silva; Afonso, Clélia Paulete Correia NevesConsidered primary sources of bioactive natural compounds with enormous applicability in various scientific-technological sectors, macroalgae have gained some prominence in recent years. The red macroalgae Gracilaria gracilis, one of the most dominant in worldwide cultivation systems, is fundamentally characterized not only by its high agar content, but also for its extraordinarily high phycobiliproteins (PBPs) levels endowed with a remarkable importance in the food industry, cosmetics, pharmaceuticals and in the field of bioactivities. The main objectives of this study consisted in manipulate laboratorily certain cultivation conditions of G. gracilis from the Lagoa de Óbidos (namely, light intensity and concentration of the macronutrients N and P (in the form of ammonia and phosphate, respectively)) and test their effects on growth, on the content of the Rphycoerythrin (R-PE) and R-phycocyanin (R-PC) PBPs, total soluble protein (TSP) content of the algal tissue and evaluate different methods of PBPs extraction applied to different states and pretreatments of algal biomass to assess the most effective method. As to the different extractions techniques used, for oven-dried wild samples, a maximum of 1.186 ± 0.008 mg of R-PE was obtained per g of dry weight with the bead beater, whereas enzymatic hydrolysis with cellulase only provided a maximum pigment content of 0.220 ± 0.001 mg R-PE g-1 of dry weight, clearly indicating that the first technique is much more efficient than the last one. For the wet samples, the methodology employing the tissue homogenizer yielded maximum values of 4.568 ± 1.773 mg R-PE g-1 WW and 0.099 ± 0.076 mg R-PC g -1 WW, proving that this extractingwith-water mechanical methodology is the most effective of the three in the extraction of phycobiliproteins from G. gracilis. One of the first things to note in culture assays is that light intensity and quality play a major role on the quality of the biomass and, thus, depending on the parameters desirable to increase in cultivation - DGR, PBPs or TSPs -, it may be preferable to use one or the other culture lamps tested - Cool White Fluorescent (CWF) or Plant Growth Fluorescent (Gro-Lux). The maximum DGR (16.219 ± 3.84 % day-1 ) was obtained for Gro-lux (with nutrient increment on the growth medium) while the obtained for CWF did not exceed the 14.936 ± 1.243 %, revealing a greater importance of nutrients (in particular, ammonium), comparatively to light, for this parameter. The TSPs concentration ranged from 18.06 ± 2.027 (for CWF) to 9.71 ± 0.364 % of dry weight (for Gro-lux without nutrient or light increment). As for R-PE and R-PC pigments, extracted with the tissue homogenizer, the highest peaks were obtained for CWF after two weeks of cultivation (9.599 ± 1.722 and 0.156 ± 0.043 mg g-1 of wet weight, respectively) - originated by a higher light intensity of the CWF lamp in comparison to the Gro-lux one. In sum, the similarity between the high levels of PBPs already studied in Gracilaria and the considerable levels of mechanically extracted R-PE in this study for Gracilaria gracilis, allied with an optimization of cultivation conditions (light and nutrients) to increase DGR, PBPs or TSP content in specific situations, may certainly justify the large-scale cultivation of this macroalgae species.
- Cultivo e Caraterização Bioquímica de Chondracanthus acicularis: Adaptação a Parâmetros Ambientais em Condições de LaboratórioPublication . Sousa, Andreia Vitorino Soares de; Mouga, Teresa Margarida Lopes da Silva; Afonso, Clélia Paulete Correia NevesA macroalga vermelha Chondracanthus acicularis destaca-se pela sua relevância ecológica e biotecnológica, sendo uma fonte de compostos bioativos com aplicações na indústria farmacêutica, cosmética e alimentar. Estudos sobre o seu cultivo, porém, são muito escassos. Este estudo teve, assim, como objetivo investigar o cultivo laboratorial desta espécie, analisando o impacto de diferentes condições de cultivo sobre o crescimento, produtividade e composição bioquímica da biomassa. Ensaios de 14 dias foram realizados utilizando três meios de cultura [Von Stosch Enrichment (VSE), Provasoli Enriched Seawater (PES) e Nutribloom Plus (NB)] e três fontes de luz (branca, LED vermelha e LED azul), sob um fotoperíodo de 12h:12h (luz:escuro). Os resultados indicaram que o meio PES, quando combinado com luz LED vermelha, proporcionou as melhores condições de cultivo, com uma taxa média de crescimento relativo (TCR) de 1,0 % dia-1. Por outro lado, o meio NB e a luz LED azul resultaram em TCR negativa, revelando condições inadequadas para o desenvolvimento da alga. A biomassa cultivada em PES e luz branca também apresentou valores mais elevados de produtividade (39,9 g PS m-3 dia-1), reforçando a eficiência destas condições. As análises bioquímicas mostraram concentrações superiores de ficoeritrina (55,26 μg mL-1) e ficocianina (8,50 μg mL-1) nas condições de luz branca e azul, respetivamente, destacando a influência da luz na síntese de pigmentos. A biomassa cultivada apresentou um teor de matéria orgânica superior (72,94 % PS) em comparação com a biomassa selvagem (69,20 % PS), confirmando a viabilidade do cultivo controlado para maximizar a produção de compostos de interesse biotecnológico. Conclui-se que o cultivo laboratorial de C. acicularis é uma alternativa sustentável à colheita selvagem, promovendo a exploração racional dos recursos naturais marinhos. Este estudo reforça a importância de parâmetros como o meio de cultura e o tipo de luz no desenvolvimento de estratégias de cultivo mais eficientes, contribuindo para o avanço das aplicações biotecnológicas desta espécie.
- Desenvolvimento de uma emulsão cosmética com potencial de antienvelhecimento por incorporação de extrato de Beta vulgaris e polissacarídeos de origem marinhaPublication . Maçarico, Andreia Malheiros; Bernardino, Raul José Silvério; Bernardino, Susana Maria da Silva Agostinho; Afonso, Clélia Paulete Correia NevesUltimamente, o setor da beleza tem ganho um lugar de importância relevante na vida do ser humano. Mas, apesar disso, a consciência do processo de envelhecimento e as suas principais causas e consequências, acoplado a uma necessidade e sensibilidade dos impactos de compostos sintéticos no ambiente e na pele, mostrou ser uma prioridade no setor da cosmética, tanto pelos consumidores, como pelas grandes indústrias. Neste sentido, procura- se uma eficaz extração de compostos com propriedades antioxidantes que levem à neutralização ou eliminação das ROS (espécies reativas de oxigénio) e à diminuição do stress oxidativo, levando ao retardamento nos sinais de envelhecimento cutâneo. Neste estudo, realizaram-se diversas extrações de Beta vulgaris subsp. cicla (acelga) com recurso a diferentes solventes (E- etanólico, E50- hidroetanólico, A- aquoso) e a diferentes partes da planta (folhas, caules, raízes), em 1%, 5% e 10% de biomassa. Os resultados variaram, destacando-se o extrato E50 que apresentou o rendimento de extração mais elevado. De seguida, foi traçado o espectro UV-Vis correspondente a cada tipo de solvente de extração de B. vulgaris. Nestes ensaios, observou-se a presença de possíveis compostos antioxidantes, determinado por dois métodos diferentes, o FRAP (Ferric Reducing Antioxidant Power) ou Poder Antioxidante de Redução de Ferro e o QTP (Quantificação do Conteúdo Fenólico Total). A extração E das folhas apresentou maior teor de compostos fenólicos, com 0,469 μg EQ. Ácido Gálico/μg extrato. No ensaio de determinação do potencial antioxidante por FRAP, os valores foram de 399,517 ± 32,678 μg EQ. Ácido Ascórbico (AA)/μg extrato, para a extração E das folhas. Quanto aos ensaios antimicrobianos, não se registou atividade contra Escherichia coli e Micrococcus luteus. Verificou-se que em ambos os microrganismos só se observou formação de halos de inibição no controlo positivo. Nos ensaios onde se avaliou a textura e cor da emulsão de creme, observou-se que os resultados não foram afetados diretamente pela introdução do alginato, podendo significar que as ligeiras alterações observadas em determinados extratos podem não ter sido diretamente relacionadas com a sua adição. Esta observação é positiva quando se trata da cor da emulsão, no sentido em que a esta não é necessariamente alterada, no caso da textura, observou-se na maioria dos extratos uma diminuição na força de coesão, o que é um bom indicador por tornar a emulsão com uma textura mais agradável e suave. Em escala industrial, o solvente E50 seria ideal para se obter um maior rendimento de extrato, enquanto o E será mais vantajoso para obter uma maior atividade antioxidante. Atualmente, ainda existe uma discrepância no que toca à literatura da beterraba e da acelga, sendo a da primeira, ainda a mais valorizada. Em todo o caso, surgiu recentemente um interesse crescente pelas muitas potencialidades da acelga, tornam-na uma peça importante para avançarmos e irmos de encontro a uma economia circular e de otimização na utilização dos recursos e dos seus benefícios, priorizando a sustentabilidade e a utilização de produtos naturais.
- Desenvolvimento de uma ferramenta multiplex-PCR para a deteção de Vibrio anguillarum, Vibrio alginolyticus, Vibrio harveyi e Yersinia ruckeri em peixes de aquaculturaPublication . Ferreira, Marco António Macieira; Afonso, Clélia Paulete Correia Neves; Baptista, Teresa Maria CoelhoAs estirpes patogénicas em estudo provocam doenças devastadoras em aquaculturas de peixes da família Salmonidae e Centropomidae (e.g. Salmão e Robalo, respetivamente). Em casos de surto, as taxas de mortalidade são extremamente elevadas e as consequências são devastadoras a nível económico, causando elevados prejuízos, visto existir uma enorme dificuldade em detetar as infeções a tempo. Com o aumento da importância e do valor económico da aquacultura tornou-se fulcral que as estirpes Vibrio anguillarum, Vibrio alginolyticus, Vibrio harveyi e Yersinia ruckeri consigam ser detetadas a tempo de modo a evitar as respetivas doenças e evitar contaminações em massa. Presentemente existem algumas ferramentas, como por exemplo, vacinas e antibióticos que possuem diferentes graus de eficácia para combater as doenças provocadas por estas estirpes, no entanto são escassas as ferramentas que detetem precocemente a presença de estirpes patogénicas, de modo a atuar de forma eficaz. As ferramentas PCR são cada vez mais utilizadas, com diversas finalidades, entre as quais a deteção de patógenos, um desenvolvimento essencial na prevenção, e assim, combate a estas doenças. Dentro das várias técnicas de PCR, o multiplex-PCR tem várias vantagens comparando com o PCR convencional, destacando-se a poupança de tempo e recursos, devido à possibilidade de deteção de várias estirpes numa única reação. A rapidez de deteção de uma ferramenta de multiplex-PCR juntamente com a sua simplicidade e baixo custo torna, uma possível ferramenta de multiplex-PCR, essencial para a deteção atempada das estirpes patogénicas prevenindo a infeção, visto que as estirpes podem ser detetadas antes que se tornem infeciosas, e o contágio para outros peixes nos tanques de aquacultura. O objetivo deste trabalho foi desenvolver e testar uma ferramenta de multiplex-PCR, procurando uma forma rápida, económica e eficaz para a deteção precoce de peixes infetados com as estirpes referidas de modo e evitar a sua propagação em tanques de aquacultura. Conseguiu-se em três das quatro estirpes uma deteção até 0,6 pg/μl e para a restante, Vibrio harveyi, 0,016 ng/μl. A ferramenta desenvolvida demonstra uma sensibilidade elevada, essencial para que possa ser implementada com sucesso, permitindo a deteção precoce destas bactérias patogénicas em peixes e potencialmente outros organismos.
- Desenvolvimento de vacinas recombinantes contra Vibrio spp. usando um canal da membrana externa como alvoPublication . Seabra, Rafaela Videira; Vieira-Pires, Ricardo Simão; Afonso, Clélia Paulete Correia NevesVibrio é um género de bactérias Gram-negativas ubíquas nos ecossistemas aquáticos. A Vibriose é uma doença hemorrágica septicémica mortal e está entre as doenças mais comuns que levam à mortalidade em massa de organismos marinhos de cultivo, sendo uma causa bem conhecida de graves perdas económicas na indústria de aquacultura. O uso de antibióticos tem sido uma prática comum também nesta indústria da aquacultura, mas a demanda global pela redução do seu uso devido ao fenómeno da resistência aos antimicrobianos tem promovido o desenvolvimento de medidas alternativas de control. A vacinação está entre essas estratégias de control da Vibriose. Os sistemas de secreção bacteriana são responsáveis em particular pela expulsão de componentes citotóxicos, nomeadamente antibióticos, e desempenham um papel crítico nos fenómenos de resistência aos antimicrobianos. No presente trabalho, utilizámos a proteína canal-túnel TolC da membrana externa, um componente dos sistemas de secreção do tipo I, como proteína alvo para o desenho de vacinas recombinantes. As proteínas TolCs de diferentes patógenos Vibrio de peixes foram identificadas e suas regiões extracelulares foram desenhadas expressas e purificadas como epítopos recombinantes e posteriormente caracterizadas em termos de estabilidade e rendimento de produção. Foram desenhados, clonamos e purificamos com sucesso 8 epítopos recombinantes correspondentes aos Loop-1 (L1) e Loop-2 (L2) extracelular dos seguintes patógenos Vibrio de peixes: V.anguillarum (VAU), V.parahaemolyticus (VPK), V. vulnificus (VVL) e V.harveyi (VHR). Todos eles apresentavam diferentes composições de aminoácidos, acabando por funcionar como assinaturas únicas para cada organismo. Esses novos produtos recombinantes serão a base para a formulação de vacinas para imunização ativa de peixes hospedeiros, ou mesmo para produção de anticorpos para procedimentos de imunização passiva. Além disso, os anticorpos derivados dessas vacinas podem ser usados para monitorização e diagnóstico patógenos Vibrio de peixes.
- Desenvolvimento e aplicação de um pipeline analítico a novas dietas formuladas com microalgas para aplicação em aquaculturaPublication . Costa, Inês Fidalgo da; Diogo, Patrícia Alexandra Cavaleiro; Afonso, Clélia Paulete Correia NevesA atual expansão do setor de aquacultura está a impulsionar o desenvolvimento de produtos baseados em microalgas produzidas industrialmente. A implementação de dietas comerciais em maternidades de aquacultura, permite a redução da produção in loco de microalgas, contribuindo para a otimização do esforço de manutenção e redução dos custos de produção nas maternidades. A combinação de espécies de microalgas adaptadas aos requerimentos nutricionais das espécies alvo e adaptadas a diferentes sistemas de cultivo, é uma estratégia pouco explorada assim como, a utilização de aditivos nas formulações, tais como probióticos e quelantes de amónia. Em larvicultura de peixes marinhos, as microalgas são utilizadas em 3 técnicas fundamentais: 1) “técnica de água verde”, 2) cultivo de rotíferos e 3) enriquecimento de alimento vivo. Desta forma, desenvolveram-se produtos adaptados às diferentes etapas de produção, nomeadamente, o produto piloto de tipologia pó, designado H2O Verde com Nannochloropsis sp e Chlorella sp. (CN) e com probióticos (CNP) para a “técnica de água verde”, de forma a aumentar a performance biológica das larvas de peixe marinhas. Para o cultivo de rotíferos, desenvolveram-se 3 produtos distintos para os diferentes modos e sistemas de produção. A formulação P.Rot Contínuo de tipologia pó, desenvolvida para o cultivo de rotíferos de forma semi-contínua, combina microalgas, probióticos e quelante de amónia para manutenção da qualidade da água. Em tipologia de concentrado líquido, desenvolveu-se o produto premium P. Rot Batch (18 % peso seco - PS) para cultivo de rotíferos em sistemas fechados e modo de produção batch. Constituído por uma solução diluente hipersalina modificada, permitiu a otimização da qualidade microbiológica do produto e do cultivo, aumentando a eficiência de produção. Os Recirculating aquaculture system’s (P. Rot RAS), começaram recentemente a ser utilizados para a produção intensiva de rotíferos em modo de produção semi-contínuo. Devido ao seu complexo sistema de filtragem, desenvolveu-se o produto P. Rot RAS, em concentrado líquido, com uma densidade mais reduzida (15 % PS) e com uma solução salina otimizada (35 ppt). Esta formulação permitiu a aplicação em sistemas RotiRAS® (IDEE aquaculture, França) sem colmatação de filtros e promoveu a eficiência do cultivo de rotíferos. Atualmente, há uma grande procura por soluções alimentares para bivalves com microalgas produzidas industrialmente uma vez que, o setor se encontra em expansão devido à súbita necessidade de aumentar a produção de sementes (pós-larvas) de bivalves em maternidades, uma vez que as alterações climáticas promoveram o declínio abrupto do recrutamento natural. As dietas comerciais existentes, não respeitam as espécies e proporções adequadas para a nutrição dos bivalves. Desta forma, as dietas BIV 1 e BIV 2 foram desenvolvidas em concentrado líquido de baixa densidade (8 % PS), para o cultivo de pós-larvas e juvenis. Posteriormente, a dieta BIV 1 foi otimizada em termos de solução salina diluente. Através do presente estágio foi possível desenvolver 7 produtos piloto para aquacultura através dos quais se estabeleceu um pipeline analítico de desenvolvimento de novos produtos de microalgas para aquacultura.