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- Desenvolvimento de uma ferramenta multiplex-PCR para a deteção de Vibrio anguillarum, Vibrio alginolyticus, Vibrio harveyi e Yersinia ruckeri em peixes de aquaculturaPublication . Ferreira, Marco António Macieira; Afonso, Clélia Paulete Correia Neves; Baptista, Teresa Maria CoelhoAs estirpes patogénicas em estudo provocam doenças devastadoras em aquaculturas de peixes da família Salmonidae e Centropomidae (e.g. Salmão e Robalo, respetivamente). Em casos de surto, as taxas de mortalidade são extremamente elevadas e as consequências são devastadoras a nível económico, causando elevados prejuízos, visto existir uma enorme dificuldade em detetar as infeções a tempo. Com o aumento da importância e do valor económico da aquacultura tornou-se fulcral que as estirpes Vibrio anguillarum, Vibrio alginolyticus, Vibrio harveyi e Yersinia ruckeri consigam ser detetadas a tempo de modo a evitar as respetivas doenças e evitar contaminações em massa. Presentemente existem algumas ferramentas, como por exemplo, vacinas e antibióticos que possuem diferentes graus de eficácia para combater as doenças provocadas por estas estirpes, no entanto são escassas as ferramentas que detetem precocemente a presença de estirpes patogénicas, de modo a atuar de forma eficaz. As ferramentas PCR são cada vez mais utilizadas, com diversas finalidades, entre as quais a deteção de patógenos, um desenvolvimento essencial na prevenção, e assim, combate a estas doenças. Dentro das várias técnicas de PCR, o multiplex-PCR tem várias vantagens comparando com o PCR convencional, destacando-se a poupança de tempo e recursos, devido à possibilidade de deteção de várias estirpes numa única reação. A rapidez de deteção de uma ferramenta de multiplex-PCR juntamente com a sua simplicidade e baixo custo torna, uma possível ferramenta de multiplex-PCR, essencial para a deteção atempada das estirpes patogénicas prevenindo a infeção, visto que as estirpes podem ser detetadas antes que se tornem infeciosas, e o contágio para outros peixes nos tanques de aquacultura. O objetivo deste trabalho foi desenvolver e testar uma ferramenta de multiplex-PCR, procurando uma forma rápida, económica e eficaz para a deteção precoce de peixes infetados com as estirpes referidas de modo e evitar a sua propagação em tanques de aquacultura. Conseguiu-se em três das quatro estirpes uma deteção até 0,6 pg/μl e para a restante, Vibrio harveyi, 0,016 ng/μl. A ferramenta desenvolvida demonstra uma sensibilidade elevada, essencial para que possa ser implementada com sucesso, permitindo a deteção precoce destas bactérias patogénicas em peixes e potencialmente outros organismos.
- Bioactive Electrospun Fibers of Poly(ε-Caprolactone) Incorporating α-Tocopherol for Food Packaging ApplicationsPublication . Dumitriu, Raluca P.; Stoleru, Elena; Mitchell, Geoffrey R.; Vasile, Cornelia; Brebu, MihaiAntioxidant activity is an important feature for food contact materials such as packaging, aiming to preserve freshness and retard food spoilage. Common bioactive agents are highly susceptible to various forms of degradation; therefore, protection is required to maintain functionality and bioavailability. Poly(ε-caprolactone) (PCL), a biodegradable GRAS labeled polymer, was used in this study for encapsulation of α-tocopherol antioxidant, a major component of vitamin E, in the form of electrospun fibers. Rheological properties of the fiber forming solutions, which determine the electrospinning behavior, were correlated with the properties of electrospun fibers, e.g., morphology and surface properties. Interactions through hydrogen bonds were evidenced between the two components. These have strong effect on structuration of macromolecular chains, especially at low α-tocopherol amounts, decreasing viscosity and elastic modulus. Intra-molecular interactions in PCL strengthen at high α-tocopherol amounts due to decreased solvation, allowing good structural recovery after cease of mechanical stress. Morphologically homogeneous electrospun fibers were obtained, with ~6 µm average diameter. The obtained fibers were highly hydrophobic, with fast release in 95% ethanol as alternative simulant for fatty foods. This induced good in vitro antioxidant activity and significant in vivo reduction of microbial growth on cheese, as determined by respirometry. Therefore, the electrospun fibers from PCL entrapping α-tocopherol as bioactive agent showed potential use in food packaging materials.