Publication
Detection and enumeration of Pseudomonas aeruginosa in coastal waters (Peniche, Portugal)
| datacite.subject.fos | Engenharia e Tecnologia::Outras Engenharias e Tecnologias | pt_PT |
| dc.contributor.advisor | Rodrigues, Maria José Ribeiro Machado | |
| dc.contributor.advisor | Afonso, Clélia Paulete Correia Neves | |
| dc.contributor.author | Januário, Adriana Pereira | |
| dc.date.accessioned | 2018-05-23T11:18:39Z | |
| dc.date.available | 2020-05-09T00:30:09Z | |
| dc.date.issued | 2018-05-09 | |
| dc.description.abstract | Pseudomonas aeruginosa é um microrganismo que possui requisitos mínimos para sobreviver, tendo uma habilidade notável para se adaptar a uma variedade de condições ambientais, estando apto para sobreviver em água destilada ou desionizada durante meses. Desde as últimas três décadas, P. aeruginosa tem vindo a ser uma das bactérias mais estudadas em saúde pública devido à sua capacidade de se poder tornar uma ameaça significativa como patogénico humano, causando infeções em quase todos os órgãos ou tecidos. Está associada a infeções no ouvido, olhos e pele, e causa infeções hospitalares sérias em pacientes com queimaduras ou com fibrose cística. A Diretiva 2006/7/EC estabelece disposições para a monitorização e a classificação da qualidade das águas balneares. Tem como propósito preservar, proteger e melhorar a qualidade do ambiente e proteger a saúde humana. No que toca a águas costeias, os parâmetros microbiológicos utilizados para classificar a qualidade das águas balneares, são enterococos intestinais (CFU/100 ml) e Escherichia coli (CFU/100 ml). P. aeruginosa não é incluído como critério microbiológico, nem tão pouco mencionado. Apesar disto, alguns autores recomendam limites para este microrganismo, sugerindo ausência em volumes de 100 ml de água. Mas, a associação entre a presença de indicadores de contaminação fecal (enterococos intestinais e E. coli) e a presença de microrganismos patogénicos não-entéricos parece não estar bem definida na literatura e, por essa razão, o propósito da primeira parte deste estudo foi estabelecer uma relação entre P. aeruginosa e esses indicadores. Os resultados revelaram uma relação positiva e moderada entre P. aeruginosa e E. coli. Assim sendo, aconselha-se a enumeração de P. aeruginosa, uma bactéria não-entérica, juntamente e completando a enumeração de E. coli e enterococos intestinais, sendo bactérias entéricas, já que são parâmetros definidos na Diretiva já mencionada. Desde os anos 60 que se têm vindo a utilizar técnicas convencionais microbiológicas para detetar e enumerar P. aeruginosa, sendo a filtração por membrana, o método mais utilizado. O procedimento na ISO 16266:2006 descreve o método de filtração por membrana para a deteção e enumeração de P. aeruginosa em amostras de água. Possuindo várias limitações, principalmente a dificuldade e morosidade da técnica, existe uma necessidade de desenvolver métodos alternativos que ultrapassem algumas das limitações encontradas nas metodologias clássicas. O novo método Pseudalert®/Quanti-Tray® MPN teste, desenvolvido pelos laboratórios da IDEXX, sinaliza a presença de P. aeruginosa em 24 horas. Esta metodologia foi formulada para água potável, de consumo e de piscina. Os resultados do presente estudo mostraram que não havia diferenças significativas quando comparado o método Pseudalert®/Quanti-Tray® MPN teste com a filtração por membrana, sugerindo que o novo teste pode ser considerado uma metodologia rápida para avaliar a contaminação por P. aeruginosa em águas costeiras. A principal limitação dos métodos de cultura microbiológicos, sejam eles tradicionais ou alternativos, é a sua incapacidade de detetar microrganismos viáveis, mas não cultiváveis. Ensaios que se baseiam em técnicas de PCR têm vindo a tornar-se mais atrativos, mas a maioria dos autores continua a utilizar procedimentos de enriquecimento ou crescimento em meio de cultura. Por isso, o objetivo da terceira parte do trabalho foi apontar uma metodologia de PCR para detetar P. aeruginosa sem qualquer crescimento bacteriano posterior. O tempo estimado do ensaio foi de 6 horas, permitindo a deteção da bactéria em estudo através da amplificação do gene ecfX utilizando a solução de lise TZ para extrair o ADN genómico presente nas membranas de filtração. Este ensaio pode ser uma alternativa viável às metodologias convencionais, quando aplicado à deteção de P. aeruginosa em águas costeiras marinhas. | pt_PT |
| dc.identifier.tid | 201919460 | pt_PT |
| dc.identifier.uri | http://hdl.handle.net/10400.8/3249 | |
| dc.language.iso | eng | pt_PT |
| dc.subject | Pseudomonas aeruginosa | pt_PT |
| dc.subject | Filtração por Membrana | pt_PT |
| dc.subject | Teste Pseudalert®/Quanti-Tray® MPN | pt_PT |
| dc.subject | gene ecfX | pt_PT |
| dc.subject | águas costeiras | pt_PT |
| dc.subject | águas balneares | pt_PT |
| dc.title | Detection and enumeration of Pseudomonas aeruginosa in coastal waters (Peniche, Portugal) | pt_PT |
| dc.type | master thesis | |
| dspace.entity.type | Publication | |
| person.familyName | Januário | |
| person.givenName | Adriana P. | |
| person.identifier.ciencia-id | 241B-FEA3-3BED | |
| person.identifier.orcid | 0000-0002-3228-922X | |
| rcaap.rights | openAccess | pt_PT |
| rcaap.type | masterThesis | pt_PT |
| relation.isAuthorOfPublication | 576c1b04-ad90-4771-80f0-e42f080e3b2b | |
| relation.isAuthorOfPublication.latestForDiscovery | 576c1b04-ad90-4771-80f0-e42f080e3b2b | |
| thesis.degree.name | Mestrado em Biotecnologia dos Recursos Marinhos | pt_PT |
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