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- Refinement of anaesthesia and analgesia protocol in gilthead seabream (Sparus aurata): 2-phenoxyethanol and clove-oil in synergy with lidocainePublication . Tchobanov, Carolina Filipe; Baptista, Teresa Maria Coelho; Antunes, LuísA redução do stress é um objetivo fundamental para promover o bem-estar e o sucesso na produção animal. É comum serem utilizados anestésicos para reduzir o stress dos animais durante alguns procedimentos. Este estudo visa refinar a concentração anestésica do 2-fenoxietanol (2PHE) e do óleo de cravo-eugenol (CO) e analgésica da lidocaína (L) em douradas (Sparus aurata). O estudo consistiu na realização de dois ensaios de refinamento de concentrações, e de um ensaio de resposta fisiológica à exposição da anestesia/ analgesia. Neste último ensaio foi retirado sangue para determinação de parâmetros hematológicos e parâmetros de resposta imune e metabólica. Analisou-se o fígado avaliando a resposta metabólica e parâmetros de stress oxidativo. Avaliou-se a expressão de genes tanto no cérebro como nas brânquias. A análise histológica das brânquias permitiu estudar as alterações na estrutura e na morfologia. Dos resultados obtidos para os parâmetros hematológicos analisados destaca-se o MCV onde se observou uma diminuição em 2PHE + L comparado com CO. No entanto, estes valores encontram-se dentro dos aceitáveis para a espécie. Nos parâmetros de stress oxidativo a CAT foi estatisticamente superior em 2PHE e 2PHE + L comparado com CO e CO + L. Para TG, existiu igualmente um aumento significativo em CO e CO + L quando comparado com 2PHE + L. A SOD mostrou um aumento significativo em 2PHE + L. Tendo em conta os resultados dos parâmetros de stress oxidativo, o melhor tratamento parece ser CO ou CO + L. Nos resultados dos parâmetros da resposta imune, na peroxidase, existiu um aumento significativo com a exposição de 2PHE + L comparado com o CO, indicando um melhor resultado quando é utilizado o óleo de cravo. Nos parâmetros metabólicos, o lactato apresentou valores acima dos valores normais para a espécie, tendo o 2PHE + L e CO + L apresentado valores significativamente superiores a CO. O ALT apresentou valores mais elevados em 2PHE + L e CO +L comparado com 2PHE e CO, e o AST apresentou valores superiores em CO + L comparando com CO. Podendo concluir-se que o uso da lidocaína apresenta um potencial efeito negativo. Na análise histológica, nas modificações progressivas, em CO observaram-se menos danos do que em 2PHE, e nas modificações regressivas o uso da lidocaína (2PHE + L e CO + L) causou mais danos do que o uso isolado da anestesia (2PHE e CO). Na análise de expressão de genes, há uma maior expressão do gene HSP70 nas brânquias havendo uma maior expressão em CO e CO + L do que em 2PHE + L. Na expressão de genes no cérebro, destaca-se o gene GST3 com maior dano associado a 2PHE + L. Em conclusão, este trabalho aponta para a utilização das doses ideais de 2-fenoxietanol (0,4 mL/L) com lidocaína (2,5 mg/L), e o óleo de cravo-eugenol (45 mg/L) em dourada. Embora o uso de lidocaína leve a uma melhoria nos tempos de indução e tempo de recuperação, sem alterações de outros parâmetros; houve também resultados que mostram um aumento de stress devido à exposição. Assim, dependendo dos objetivos do trabalho e do composto anestésico utilizado, a utilização da analgesia pode ser favorável. No entanto, são necessários mais estudos para compreender melhor a sinergia com a analgesia utilizando outros anestésicos sintéticos e naturais.
- Lidocaine supplementation in clove-oil and 2-phenoxyethanol anesthesia for gilthead seabream (Sparus aurata)Publication . Tchobanov, Carolina F.; Vaz, Mariana; Pires, Damiana; Passos, Ricardo; Antunes, Luís M.; Baptista, TeresaAnimal welfare and reducing stress during procedures are key objectives for success in animal production. Anesthesia has been used for procedures to reduce animal stress and its negative impact on welfare. This study aimed first to refine the concentrations of the anesthetic clove-oil (CO) and lidocaine (L) in gilthead seabream (Sparus aurata) juveniles (56.0 ± 15.09 g) and then combine clove-oil and 2-phenoxyethanol (2PHE) with the refined concentration of lidocaine. The concentrations of clove-oil (30, 45, and 60 mg L− 1), and the concentrations of lidocaine (2.5, 5, and 7.5 mg L− 1), were evaluated in the refinement trial. Based on these results, a second trial was performed with 45 mg L− 1 CO or 0.4 mL L− 1 2PHE as anesthetics alone or combined with 2.5 mg L− 1 of lidocaine. Results from this work showed an improvement in induction times for 2-phenoxyethanol when lidocaine was added (2PHE 179.53 ± 63.21 s; 2PHE + L 130.65 ± 40.16 s). Recovery time also showed a reduction for clove-oil when lidocaine was used (CO 349.90 ± 123.69 s; CO + L 250.11 ± 51.99 s). The use of lidocaine showed better results, reducing lactate and histological progressive alterations. Lidocaine showed stress-induced oxidative alterations when it was combined with 2-phenoxyethanol. Lidocaine exposure increased ALT, AST, histological regressive alterations for both anesthetics, and gene expression of hsp70 in the gills when clove-oil was used. Further studies are necessary to comprehend the synergistic effects of lidocaine when combined with synthetic and natural anesthetics and to discern potential acute or chronic toxic responses in fish. These insights will be crucial for refining anesthesia protocols and ensuring the well-being of aquatic species in aquaculture practices and research settings.
- Proximate composition and fatty acid profile of Gilthead seabream (Sparus aurata) fed with Pelvetia canaliculata supplemented diets: An insight towards the valorization of seaweed biomassPublication . Antunes, Madalena; Neves, Marta; Pires, Damiana; Passos, Ricardo; Carmo, Beatriz do; Tchobanov, Carolina F.; Forte, Sara; Vaz, Mariana; Baptista, Teresa; Tecelão, CarlaSeaweeds are a sustainable source of protein and lipids that may be used to replace fish by-products in aquaculture feed. This study aimed at using the macroalgae Pelvetia canaliculata as an ingredient in gilthead seabream (Sparus aurata) feed, either as freeze-dried powder or as algae residue (waste) that was obtained after the supplementation of sunflower oil. The formulated diets and the fish muscle were analyzed concerning the proximate composition and the fatty acid profile. The health lipid indices hypocholesterolemic/ hypercholesterolemic (h/H), atherogenic (AI), thrombogenic (TI), as well as n-3/n-6 and polyunsaturated fatty acid/saturated fatty acid (PUFA/SFA) ratios were calculated. Additionally, the peroxidizability index (PI) was determined. No differences were observed in the proximate composition of fish muscle regardless of the diet used. Fish fed a diet supplemented with 10% of algae waste (W10) stand out for the highest content in oleic acid (C18:1 n-9), and the lowest in both linoleic (C18:2 n-6) and palmitic (C16:0) fatty acids. All fish samples showed values of health lipid indices within the limits recommend for a nutritional balanced diet. These results highlight that fish fed diets supplemented with P. canaliculata are sources of healthy lipids that might be consumed on a regular basis to prevent cardiovascular diseases.