Percorrer por autor "Pinto, Micaela Ferreira"
A mostrar 1 - 2 de 2
Resultados por página
Opções de ordenação
- Development of a multiplex PCR tool for screening of pathogens in teleost farmed fishPublication . Pinto, Micaela Ferreira; Afonso, Clélia Paulete Correia Neves; Baptista, Teresa Maria CoelhoA aquacultura desempenha um papel cada vez mais importante na produção de alimentos em todo o mundo (Martins et al., 2015). Espécies dos géneros Aeromonas, Vibrio, Edwardsiella e Streptococcus são patógenos que infetam peixes (Zhang et al., 2014), causando elevadas perdas económicas em aquacultura. A corvina (Argyrosomus regius, Asso, 1801) é um dos maiores peixes da família Sciaenidae a nível mundial, e uma espécie de elevado valor comercial no Sudoeste da Europa, sendo neste momento objeto de grande interesse em todo o Mediterrâneo visando a sua produção comercial (Amoedo, 2011). Devido à sua elevada fertilidade, ampla distribuição e boa aceitação por parte dos consumidores torna-se um bom candidato à produção em aquacultura podendo atingir preços de mercado médio-altos (6 euros/kg, INE 2010). Como ainda não foram reportadas manifestações patológicas relevantes nesta espécie, o principal método de prevenção é o controlo da densidade nos tanques, sendo necessário pesquisar eventuais patógenos que afetem a corvina em diferentes estádios do seu ciclo e mesmo em condições de stress. O objetivo deste estudo foi o desenvolvimento de uma ferramenta de multiplex- PCR para a deteção precoce de Edwardsiella tarda, Photobacterium damselae subsp. piscicida, Vibrio alginolyticus, Vibrio anguillarum e Vibrio harveyi em peixes de aquacultura, incluindo a corvina, que permita de forma prática e eficiente a deteção destes patógenos. Concluiu-se que é possível através de ferramentas de multiplex-PCR, a deteção dos patogénicos Edwardsiella tarda, Vibrio alginolyticus, Vibrio anguillarum e Vibrio harveyi até um limite mínimo de 0,4 ng de DNA/μl para V. anguillarum; 0.5 ng/μl para E. tarda; 1.5 ng/μl para V. harveyi e 5.6 ng/μl para V. alginolyticus, podendo, no futuro, estas técnicas ter aplicação prática cada vez mais extensa.
- Development of a new multiplex-PCR tool for the simultaneous detection of the fish pathogens Vibrio alginolyticus, Vibrio anguillarum, Vibrio harveyi and Edwardsiella tardaPublication . Pinto, Micaela Ferreira; Baptista, Teresa; Afonso, Clélia Correia NevesDisease assessment and management in cultured aquatic animals is a major concern in commercial aquaculture. Disease outbreaks have direct effects on fish production, causing serious economic losses in this industry. This can be overcome by early detection through molecular high sensitivity tools such as PCR (polymerase chain reaction). One of the most critical steps in the study of bacterial fish diseases is the precise identification of the infectious agent. Considering the damage that some bacteria can cause to fish and humans, the development of a rapid detection method for the four target species that demonstrates to be simple, accurate and low cost is an essential step for the prevention and early treatment of these diseases. Edwardsiella tarda (ACC 36.1), Vibrio harveyi (DSM 19023), Vibrio anguillarum (AQV 55.1) and Vibrio alginolyticus (CECT 521) were selected as targets of a multiplex PCR tool. The multiplex PCR reactions were performed in various reaction conditions, including different annealing temperatures (between 49 °C and 55 °C) and changes in the MgCl2 concentration from 2mMto 8 mM. Best results were obtained at 51 °C and MgCl2 concentration from 4mM to 6 mM. Primers were tested using purified DNA from the respective bacterial strains, yielding bands at expected sizes, which can be identified on agarose gels with clearness and without overlapping sizes. Results indicate that this multiplex PCR tool is suitable for the detection of target pathogens and may, in the future, have extended practical application in commercial aquaculture.